2025年3月，中檢院動(dòng)物所在學(xué)術(shù)期刊《Antiviral Research》發(fā)表題為“CVA16 infection causesneurological injury by engaging TLR2/MYD88/TNF-α/CXCL1 signaling pathway inhSCARB2 knock-in mice”的研究論文，展示了自主建立的hSCARB2基因修飾小鼠-CVA16感染模型，并基于該模型初步揭示了病毒感染引發(fā)神經(jīng)損傷的分子機(jī)制。

CVA16（Coxsackievirus A16）是引發(fā)兒童手足口病（HFMD）的主要病原體之一，在中國(guó)及亞太其他地區(qū)多次取代EV-A71成為優(yōu)勢(shì)流行株。盡管CVA16通常被認(rèn)為引起較輕微的HFMD癥狀，但臨床和實(shí)驗(yàn)室研究結(jié)果均表明該病毒感染可能引起神經(jīng)損傷，且目前已上市的EV-A71疫苗對(duì)CVA16感染無(wú)交叉保護(hù)作用。由于缺乏合適的感染/疾病動(dòng)物模型，CVA16感染的神經(jīng)損傷致病機(jī)制長(zhǎng)期不明，CVA16疫苗的研發(fā)亦受阻。

本研究利用3周齡hSCARB2基因修飾小鼠模型，成功建立了CVA16感染/疾病模型。hSCARB2小鼠感染后表現(xiàn)為行動(dòng)遲緩、弓背、共濟(jì)失調(diào)、肢體無(wú)力甚至麻痹等嚴(yán)重臨床癥狀；在骨骼肌、腦和脾臟等靶器官中檢測(cè)到高滴度病毒載量；通過(guò)免疫組化染色，進(jìn)一步證明了hSCARB2小鼠對(duì)CVA16病毒的易感性。CVA16感染小鼠后能引發(fā)腦組織和骨骼肌組織的炎癥反應(yīng)，而脊髓中未見(jiàn)明顯病理變化。此外，CVA16感染引發(fā)細(xì)胞因子風(fēng)暴，且為Th1型傾向，與臨床觀(guān)察結(jié)果相符。通過(guò)共聚焦技術(shù)觀(guān)察發(fā)現(xiàn)，hSCARB2小鼠感染后的腦組織中可見(jiàn)典型的小膠質(zhì)細(xì)胞活化和神經(jīng)纖維損傷。研究進(jìn)一步對(duì)感染組和未感染組腦組織的RNA-Seq測(cè)序，并進(jìn)行精細(xì)的生信分析，首次揭示該神經(jīng)損傷可能涉及TLR2/MYD88/TNF-α/CXCL1信號(hào)通路，并在mRNA和蛋白水平上進(jìn)行了驗(yàn)證，初步揭示了病毒感染引發(fā)神經(jīng)損傷的分子機(jī)制。本研究結(jié)果還表明，hSCARB2基因修飾小鼠對(duì)CVA16易感，癥狀明顯，表型穩(wěn)定，為CVA16單價(jià)疫苗、CVA16-EVA71二價(jià)苗的研制提供了良好的非臨床體內(nèi)有效性評(píng)價(jià)模型。

中檢院動(dòng)物所碩士研究生王煜、動(dòng)物所模式室吳勇為論文的共同第一作者。中檢院胡忠玉研究員、范昌發(fā)研究員為論文的共同通訊作者。該研究得到國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃的立項(xiàng)支持，課題開(kāi)展過(guò)程中與腸道病毒疫苗研發(fā)企業(yè)保持溝通，以便于推動(dòng)模型動(dòng)物在疫苗效力評(píng)價(jià)中的實(shí)際應(yīng)用。

（范昌發(fā) 付志浩）